1 00:00:00,980 --> 00:00:05,500 بسم الله الرحمن الرحيم موضوعنا اليوم فحص 2 00:00:05,500 --> 00:00:10,740 Hemoglobin A2 Hemoglobin 3 00:00:10,740 --> 00:00:16,640 A2 من الـ Hemoglobin اللي موجود بشكل Normal في 4 00:00:16,640 --> 00:00:22,220 الـ Adult طبعا هو بتكون من 2 Alpha و 2 Delta تش 5 00:00:22,220 --> 00:00:29,110 يعني Hemoglobin A2 بشكل عند الشخص الـ Normal من 1.8 6 00:00:29,110 --> 00:00:35,770 من 1.8 إلى 3.5 ممكن يرتفع Hemoglobin A2 Hemoglobin 7 00:00:35,770 --> 00:00:40,270 A2 لو لاحظته لا يحتوي على الـBeta-Chain فعادة لو 8 00:00:40,270 --> 00:00:45,390 كان في خلل في Beta-Chain عند المريض راح نلاقي أنه 9 00:00:45,390 --> 00:00:50,050 هيرتفع Hemoglobin A2 من باب تعويض الخلل الموجود 10 00:00:50,050 --> 00:00:53,670 لأن مافيش فيه Beta-Chain زي ما قلنا فمن الحالات 11 00:00:53,670 --> 00:00:57,650 الـBeta-thalassemia-3 و الـHomozygous-thalassemia 12 00:00:58,450 --> 00:01:04,450 هذه حالات ممكن يرتفع فيها Hemoglobin A2 أما بينقص 13 00:01:04,450 --> 00:01:08,130 في حالات Iron deficiency anemia في حالة Hemoglobin 14 00:01:08,130 --> 00:01:11,430 H Disease في حالة Hereditary Persistence of 15 00:01:11,430 --> 00:01:14,810 Hemoglobin F إيش يعني Hereditary Persistence of 16 00:01:14,810 --> 00:01:19,650 Hemoglobin F؟ هدول ناس بيضل Hemoglobin F يتصنع 17 00:01:19,650 --> 00:01:22,190 عندهم حتى لما بيكبروا يعني إحنا عارفين إن 18 00:01:22,190 --> 00:01:26,620 Hemoglobin F بيصير له switch off عند 6 شهور بيبطل 19 00:01:26,620 --> 00:01:30,420 يتصنع أو بتصنع بكمية ضئيلة جدا وبيصير اللي يتصنع 20 00:01:30,420 --> 00:01:35,220 Hemoglobin A لكن فيه جماعة من الناس بيظل عندهم 21 00:01:35,220 --> 00:01:39,940 Hemoglobin F موجود بمسبة ممكن توصل 40% من الـ 22 00:01:39,940 --> 00:01:43,000 Total Hemoglobin اللي عندهم هذه الحالة بيسموها 23 00:01:43,000 --> 00:01:46,320 Hereditary Resistance of Hemoglobin F كيف بتصير؟ 24 00:01:46,320 --> 00:01:49,700 إنه ما بيصير switch off لتصنيع Hemoglobin F بشكل 25 00:01:49,700 --> 00:01:54,680 كامل فبيظل يتصنع على مدى الحياة حالة الـ 26 00:01:54,680 --> 00:02:01,400 Fibroplastic Anemia حالة فحص مقلبن A2 بيعتمد على 27 00:02:01,400 --> 00:02:05,860 principle تسمى بالـ Ion Exchange Chromatography 28 00:02:05,860 --> 00:02:09,480 الـ Ion Exchange Chromatography حقيقة في منها 29 00:02:09,480 --> 00:02:14,040 نوعين نوع يسمى Anion Exchange Chromatography ونوع 30 00:02:14,040 --> 00:02:18,600 يسمى Cation Exchange Chromatography وهذه الطريقة 31 00:02:18,600 --> 00:02:23,040 جيدة ويعني بتعطي نتائج ممتازة لهيمoglobin A2 ماشي 32 00:02:23,040 --> 00:02:25,780 الفرق بين الـ Anion Exchange والـ Cation Exchange 33 00:02:25,780 --> 00:02:31,600 هي الفكرة بتعتمد على وجود حبيبات تسمى بالرزن هذه 34 00:02:31,600 --> 00:02:36,260 الحبيبات تكون مشحونة إما بشحنة سالبة أو بشحنة 35 00:02:36,260 --> 00:02:41,770 موجبة الآن إذا كانت مشحونة بشحنة موجبة هتستقطب 36 00:02:41,770 --> 00:02:45,990 الشحنات السالبة حولها ويسمى هذا بالـ Anion 37 00:02:45,990 --> 00:02:49,610 Exchange Chromatography إذا كانت مشحونة بشحنة 38 00:02:49,610 --> 00:02:53,850 سالبة ستستقطب الشحنات الموجبة ويسمى الـ Cation 39 00:02:53,850 --> 00:02:59,530 Exchange Chromatography المُغلب من أيه؟ خلينا نشوف 40 00:02:59,530 --> 00:03:02,410 إيش هي الـ Principle للـ Ion Exchange 41 00:03:02,410 --> 00:03:05,410 Chromatography طبعا زي ما قلنا في عندنا أنيون وفي 42 00:03:05,410 --> 00:03:08,750 عندنا كتايون أنا هحكي عن الانيون الكلام نفسه 43 00:03:08,750 --> 00:03:12,790 بينطبق على الكتايون بس يعني الشحنات بالعكس بتكون 44 00:03:12,790 --> 00:03:19,830 طيب، الآن أول حاجة بعملها بحضر 45 00:03:19,830 --> 00:03:23,490 Hemolysate من الـ Blood الـ Hemolysate الهدف منه 46 00:03:23,490 --> 00:03:26,710 أني أطلّع الـ Hemoglobin الموجود بداخل الخلايا 47 00:03:27,560 --> 00:03:30,600 وباجي بحطه في الـ Column طب إيش هو الـ Column؟ الـ 48 00:03:30,600 --> 00:03:35,100 Column زي ما انتوا شايفين Column صغير بيكون فيه 49 00:03:35,100 --> 00:03:39,400 فتحة علوية أحط من خلالها العينة بتاعتى أو في من 50 00:03:39,400 --> 00:03:44,420 تحت برضه فتحة صغيرة هادى بتعمل ترشيح للثائل أو 51 00:03:44,420 --> 00:03:48,060 بنزل من خلالها الثائل الآن في داخل ال Column عندي 52 00:03:48,060 --> 00:03:53,760 مركب بيسموه «Diecyl Aminoacyl Resin» هو عبارة عن 53 00:03:53,760 --> 00:03:59,600 مركب سيليوزي ال particles بتاعته كبيرة بحيث انه هذه 54 00:03:59,600 --> 00:04:03,040 الـ particles فيه هنا filter بمنع نزولها يعني ال 55 00:04:03,040 --> 00:04:06,480 particles هذه لأنها كبيرة هتظل في قلب ال column مش 56 00:04:06,480 --> 00:04:12,400 هتنزل خلال عملية تجميع السوائل، تمام؟ إذن، خلاصة 57 00:04:12,400 --> 00:04:17,540 الكلام، في عندي رزن، الرزن هذا شحناته موجبة، كويس؟ 58 00:04:17,540 --> 00:04:21,540 طيب، أنا بحط الهيمولايزات اللي حضرته على الرزن هذا 59 00:04:21,540 --> 00:04:29,280 و بكمل الخطوات ابتعد، خليني أشوف الآن لما بضيف الـ 60 00:04:29,280 --> 00:04:32,860 Hemolysate على الرزن الـ Hemolysate عبارة عن أنواع 61 00:04:32,860 --> 00:04:38,160 من الـ Hemoglobin أنا بضبط الـ Buffer BH بحيث أنه 62 00:04:38,160 --> 00:04:43,300 بتعطيني .. بتعطي الـ Hemoglobin شحنات سالبة تمام؟ 63 00:04:43,300 --> 00:04:47,640 بتعطي الـ Hemoglobin شحنات سالبة طبعاً شحنات الـ 64 00:04:47,640 --> 00:04:51,700 Hemoglobin السالبة هتخلي يرتبط مع مين؟ مع الرزن 65 00:04:51,700 --> 00:04:58,410 كويس؟ طيب هلقيت؟ الـ Hemoglobin اللي ارتبط مع الرزن 66 00:04:58,410 --> 00:05:03,810 مش هيقدر ينزل من عبر عملية تجميع السائل من عبر 67 00:05:03,810 --> 00:05:08,090 الفتحة هذه صح ولا لأ؟ مين اللي بينزل؟ الـ 68 00:05:08,090 --> 00:05:13,750 Hemoglobin اللي مارتبطش الآن في هذه الطريقة الـ pH 69 00:05:13,750 --> 00:05:17,650 تعطي الـ Buffer بتعمل شغلة مهمة كتير إنه بتعطي كل 70 00:05:17,650 --> 00:05:21,710 أنواع الـ Hemoglobin شحنة سالبة قوية بحيث إنه كل 71 00:05:21,710 --> 00:05:25,930 أنواع الـ Hemoglobin ترتبط مع الرزن ولا تنزل خلال 72 00:05:25,930 --> 00:05:29,690 عملية تجميع السائل أو خلال عملية الـ filtration ما 73 00:05:29,690 --> 00:05:33,610 عدا Hemoglobin A2 Hemoglobin A2 بتكون شحنته 74 00:05:33,610 --> 00:05:38,670 سالبة ضعيفة جدا فلا يرتبط لزيئات الرزن وبالتالي 75 00:05:38,670 --> 00:05:44,600 بسهولة ممكن أنا السائل اللي بنزل هيكون محامل معاه 76 00:05:44,600 --> 00:05:47,300 فقط الـ Hemoglobin اللي مرتبطش اللي هو من 77 00:05:47,300 --> 00:05:51,580 Hemoglobin A2 إذن in this procedure Hemoglobin A2 78 00:05:51,580 --> 00:05:54,840 originally bound to the resin is released from the 79 00:05:54,840 --> 00:05:59,140 resin and eluted by the developer and it passes 80 00:05:59,140 --> 00:06:03,400 through the column إذن Hemoglobin A2 هينزل لأنه هو 81 00:06:03,400 --> 00:06:07,480 الوحيد اللي مش راح يقدر يرتبط عشان شحنته السالبة 82 00:06:07,480 --> 00:06:11,750 بتكون ضعيفة فبصير عندى في الـ Cube Ash Hemoglobin 83 00:06:11,750 --> 00:06:16,130 A2 الآن 84 00:06:16,130 --> 00:06:19,850 most other normal and abnormal hemoglobins remain 85 00:06:19,850 --> 00:06:22,630 bound to the resin بقيت أنواع الهمoglobin هتظل 86 00:06:22,630 --> 00:06:27,570 مرتبطة بالرزن الـ eluted hemoglobin A2 is then 87 00:06:27,570 --> 00:06:31,230 measured spectrophotometrically and compared with 88 00:06:31,230 --> 00:06:34,050 the amount of total hemoglobin in the specimen to 89 00:06:34,050 --> 00:06:38,760 calculate the percent of hemoglobin A2 يعني باخد 90 00:06:38,760 --> 00:06:42,300 الـ Absorbance لهيمoglobin A2 وبناخد قراقة للـ 91 00:06:42,300 --> 00:06:45,620 Total Hemoglobin عشان أنا مطلوب إني أحسب النسبة 92 00:06:45,620 --> 00:06:48,280 المئوية لهيمoglobin A2 بالنسبة للـ Total 93 00:06:48,280 --> 00:06:54,740 Hemoglobin طبعا طريقة الشغل يعني مبلش نحكيها هلقات 94 00:06:54,740 --> 00:06:58,600 بس هي كفكرة بتشمل تلت مراحل المرحلة الأولى 95 00:06:58,600 --> 00:07:02,100 Hemolysate Preparation في طريقة معينة بكسر فيها 96 00:07:02,100 --> 00:07:07,440 الـRBCs الثانية أني بدي أفصل Hemoglobin A2 أكيد هحط 97 00:07:07,440 --> 00:07:11,460 الـ Hemolysate في الرزم و أحط buffer عشان ال 98 00:07:11,460 --> 00:07:14,960 buffer هو نازل خلال ال filtration ياخد معاه 99 00:07:14,960 --> 00:07:21,850 Hemoglobin A2 وأقرأ اللي بيطلع على 415 نانومتر بعد 100 00:07:21,850 --> 00:07:25,570 هيك في عندى الـ Total Hemoglobin زي ما قلتلكم بدنا 101 00:07:25,570 --> 00:07:28,690 نعمل قياس للـ Total Hemoglobin عشان أجيب نسبة 102 00:07:28,690 --> 00:07:32,390 Hemoglobin A2 بالنسبة للـ Total Hemoglobin بحضر 103 00:07:32,390 --> 00:07:35,370 الـ Total Hemoglobin بطريقة معينة وبجيب ال 104 00:07:35,370 --> 00:07:39,230 absorbance إليه بعد هيك بدرب اللي هو نسبة 105 00:07:39,230 --> 00:07:41,610 Hemoglobin A2 هتطلع عندى ال absorbance لـ 106 00:07:41,610 --> 00:07:45,570 Hemoglobin A2 على ال absorbance للـ Total هنا في 107 00:07:45,570 --> 00:07:50,030 25 هو في الواقع يبقى نتهدي الـ 25 جاية من وينهو 108 00:07:50,030 --> 00:07:53,510 الأصل أنا بدي أجيب نسبة مئوية فبدي أضرب في مية صح؟ 109 00:07:53,510 --> 00:07:56,790 Absorbance للـ A2 على Absorbance للـ Total في 100% 110 00:07:56,790 --> 00:08:02,570 لكن هناك فرق في التخفيفات يعني بالنسبة لـ 111 00:08:02,570 --> 00:08:05,690 Hemoglobin A2 عشان أقارنه بالـ Total يكون مر بنفس 112 00:08:05,690 --> 00:08:09,230 التخفيف اللي مر فيه Total لكن لأن هناك فرق في 113 00:08:09,230 --> 00:08:13,250 التخفيفات ففي عندي المية بقسمها على 4 عشان تطلع 114 00:08:13,250 --> 00:08:16,950 نتيجتي صحيحة تمام؟ وبحسب النسبة المئوية لـ 115 00:08:16,950 --> 00:08:21,560 Hemoglobin A2 الـ Expected Values اللي هي مجلوب من 116 00:08:21,560 --> 00:08:26,200 A2 الـ Control طبعاً بيكون Normal من 1.8 إلى 3.2 117 00:08:26,200 --> 00:08:31,860 من 10 الهيتيروزايجس بيتا ثلاثيمية 3.2 إلى 5 118 00:08:31,860 --> 00:08:38,850 هوموزايجس بيتا ثلاثيمية طيب، هنشوف بعض الملاحظات 119 00:08:38,850 --> 00:08:42,330 أول حاجة الفحص أنا مش لازم أعمله قبل ما يصير عمر 120 00:08:42,330 --> 00:08:44,970 الطفل 6 شهور لأنه قبل 6 شهور زي ما أحنا عارفين 121 00:08:44,970 --> 00:08:48,610 بيبقى في عندي نسبة عالية من Hemoglobin F وما بقدر 122 00:08:48,610 --> 00:08:52,650 أقرر نسب الـ Hemoglobin لهذا الشخص if the patient 123 00:08:52,650 --> 00:08:56,410 has erogas for beta-thalassemia also had iron 124 00:08:56,410 --> 00:08:59,610 deficiency anemia the hemoglobin A2 may be within 125 00:08:59,610 --> 00:09:03,240 the normal range، هذه النقطة كتير مهمة هلقيت البنات 126 00:09:03,240 --> 00:09:07,300 في عندي يعني فحص الـ Hemoglobin A2 كتير مهم في 127 00:09:07,300 --> 00:09:11,060 الفصل ما بين الناس الحاملة للـ Beta-thalassemia و 128 00:09:11,060 --> 00:09:14,160 الناس اللي عندها Iron deficiency anemia هلقيت اللي 129 00:09:14,160 --> 00:09:17,400 عندهم Beta-thalassemia ال career بيبقى عندهم 130 00:09:17,400 --> 00:09:21,260 Hemoglobin A2 مرتفع بينما الناس اللي عندهم Iron 131 00:09:21,260 --> 00:09:25,710 deficiency anemia بينخفض Hemoglobin A2 وهذه يعني من 132 00:09:25,710 --> 00:09:29,290 الحاجات اللي احنا بنستخدمها عشان نعمل diagnosis أو 133 00:09:29,290 --> 00:09:33,610 نفصل ما بين الـ Beta-thalassemia وما بين الـ Iron 134 00:09:33,610 --> 00:09:37,830 deficiency anemia طيب، هلقيت في واحد، في شخص مثلا، 135 00:09:37,830 --> 00:09:42,330 بيكون حامل للـ Beta-thalassemia لكن بعد فترة معينة 136 00:09:42,330 --> 00:09:46,330 من العمر اتكون عنده نقص حديد وصار عنده Iron 137 00:09:46,330 --> 00:09:49,520 deficiency anemia يعني صار عنده التنتان الـ beta 138 00:09:49,520 --> 00:09:52,560 -thalassemia هترفع الـ hemoglobin A2 والـ iron 139 00:09:52,560 --> 00:09:55,660 deficiency أنيميا هتنقص الـ hemoglobin A2 فهذا 140 00:09:55,660 --> 00:10:00,180 هينتج عنه hemoglobin A2 normal فأنا عشان أعمل 141 00:10:00,180 --> 00:10:03,500 تشخيص صحيح في هذه الحالة أو أنا لو كنت شاكة بحالة 142 00:10:03,500 --> 00:10:06,980 من هذا النوع بعالج الحاجة اللي بتتعالج مش الحاجة 143 00:10:06,980 --> 00:10:09,280 اللي بتتعالج طبعا الـ thalassemia مابتتعالج لأنه 144 00:10:09,280 --> 00:10:12,940 خلال وراسي خلال جيني بعالج الـ iron deficiency 145 00:10:12,940 --> 00:10:16,640 أنيميا فممكن أنا أعطي المريضعلاج لـ Iron 146 00:10:16,640 --> 00:10:20,780 deficiency anemia باعطيه حديد فترة معينة بعد أربع 147 00:10:20,780 --> 00:10:26,440 شهور باجي بعمل Hemoglobin A2 كمان مرة بلاقي أن 148 00:10:26,440 --> 00:10:32,560 الوضع صار أصدقاء كيف يعني؟ هلاقيت أنا كانت عندي 149 00:10:32,560 --> 00:10:37,900 أساسا Hemoglobin A2 مرتفعة لكن كون ارتفعت يعني أجت 150 00:10:37,900 --> 00:10:41,260 لحقت بحالة الثلاثيميا حالة Iron deficiency anemia 151 00:10:41,260 --> 00:10:45,770 كان نزل ال Hemoglobin A2 تمام؟ فصرت أنا جيت للشخص 152 00:10:45,770 --> 00:10:48,570 لقيت الـ Hemoglobin A2 Normal لكن أنا لازم اتشاك 153 00:10:48,570 --> 00:10:52,770 أنه عنده Beta Thalassemia فبروح بشوف الـ Iron 154 00:10:52,770 --> 00:10:56,350 Profile فحصات الحديد حلاقي عنده نقص في الحديد بروح 155 00:10:56,350 --> 00:11:00,170 بعطيه حديد بعالج الـ Iron Deficiency Anemia بستنق 156 00:11:00,170 --> 00:11:03,070 كل الخلايا اللي فيها Iron Deficiency انها تنتهي 157 00:11:03,070 --> 00:11:06,090 قداش بدها من 3 شهور إلى 4 شهور اللي هو عمر الـ 158 00:11:06,090 --> 00:11:10,130 RBCs عشان يتصنع خلايا جديدة مافيش فيها Iron 159 00:11:10,130 --> 00:11:13,750 Deficiency بعد الأربع شهور بروح دقيس Hemoglobin A2 160 00:11:13,970 --> 00:11:17,890 هلأ بعد مباقية الـ Hemoglobin A2 هيكون هنا اتعدل 161 00:11:17,890 --> 00:11:21,930 بفعل تعديل الحديد فإذا كان فعلا هذا الشخص عنده 162 00:11:21,930 --> 00:11:25,770 Beta-thalassemia بعد علاج الحديد ملاقي الـ 163 00:11:25,770 --> 00:11:30,470 Hemoglobin A2 ارتفع، تمام؟ الشغل التاني إذا كان 164 00:11:30,470 --> 00:11:34,090 المريض بياخد نقل دم أو ما أخد نقل دم مش لازم أعمله 165 00:11:34,090 --> 00:11:39,430 هذا الفحص لأنه بنقل الدم هيكون عنده دم مش الدم 166 00:11:39,430 --> 00:11:43,890 الخاص فيه فبالتالي هلاقي نتيجة الـ Hemoglobin اتوا 167 00:11:43,890 --> 00:11:47,890 مش صحيحة some of the abnormal hemoglobin زي 168 00:11:47,890 --> 00:11:53,340 Hemoglobin S وC وO وE وG hybrid ممكن تتدخل في نتيجة 169 00:11:53,340 --> 00:11:56,340 الـ Hemoglobin A2 في هذه الطريقة «الوجود 170 00:11:56,340 --> 00:11:59,400 للهمoglobin غير عادل يجب أن يتم اكتشاف بشكل 171 00:11:59,400 --> 00:12:03,240 إلكتروفوريسي» «Hemoglobin F لا يتعاني من هذه 172 00:12:03,240 --> 00:12:05,720 الطريقة» يعني في بعض أنواع الـ Hemoglobin ممكن 173 00:12:05,720 --> 00:12:09,980 تتدخل في النتيجة وتعطيني نتيجة خاطئة لكن فبالتالي 174 00:12:09,980 --> 00:12:13,160 أنا بدي أعمل confirmation لوجودها أو عدمه عن طريق 175 00:12:13,160 --> 00:12:17,380 الـ Electrophoresis «Hemoglobin F لا يتعاني من هذه 176 00:12:17,380 -->