1
00:00:01,030 --> 00:00:05,650
بسم الله الرحمن الرحيم موضوعنا اليوم ان شاء الله

2
00:00:05,650 --> 00:00:11,850
رب العالمين «Saccharose Hemolysis Test»

3
00:00:11,850 --> 00:00:15,250
«Saccharose

4
00:00:15,250 --> 00:00:21,550
Hemolysis Test» يعتبر كفحص تعزيزي أو تأكيدي لتشخيص

5
00:00:21,550 --> 00:00:25,570
حالة الـ BNH اللي هي الـ Paroxymal Noctorial

6
00:00:25,570 --> 00:00:31,480
Hemoglobinuria لو شخص احنا شكينا عندهاللي هو الـ

7
00:00:31,480 --> 00:00:36,580
BNH البروكزيما النكتوريا الـ Hemoglobinuria بنعمله

8
00:00:36,580 --> 00:00:42,080
بداية فحص يسمى Sugar Water Test هذا يعتبر

9
00:00:42,080 --> 00:00:45,900
Screening Test يعني بقول النتيجة Positive أو

10
00:00:45,900 --> 00:00:50,000
Negative الآن لما تطلع معايا نتيجة Sugar Water

11
00:00:50,000 --> 00:00:54,980
Test Positive بروح بعمل الـ Saccharose Hemolysis

12
00:00:54,980 --> 00:00:59,940
Test عشان أؤكد النتيجة اللي عنديوأشوف نسبة الـ

13
00:00:59,940 --> 00:01:04,980
Hemolysis اللي صارت عند المرض طيب الـ BNH اللي هو

14
00:01:04,980 --> 00:01:07,780
الـ Paroxysmal Noctorial Hemoglobinuria عبارة عن

15
00:01:07,780 --> 00:01:11,520
إيش؟ عبارة عن acquired clonal disorder of

16
00:01:11,520 --> 00:01:16,560
hemolysis in which the patient red cells are

17
00:01:16,560 --> 00:01:19,660
abnormally sensitive to lyses by normal

18
00:01:19,660 --> 00:01:24,280
constituents of plasma يعني الناس المصابين بهذا

19
00:01:24,280 --> 00:01:29,040
المرضبيصير عندهم disorder في الـ hemobiosis بحيث

20
00:01:29,040 --> 00:01:34,120
أنه الخلايا الـ RBCs اللي عندهم بتصير حساسة

21
00:01:34,120 --> 00:01:37,200
للمكونات الطبيعية اللي موجودة في البلازمة زي الـ

22
00:01:37,200 --> 00:01:39,740
complement يعني بيصيروا حساسين لوجود الـ

23
00:01:39,740 --> 00:01:43,620
complement و الـ complement هنا هتعمل عندهم

24
00:01:43,620 --> 00:01:48,940
license للخلايا وتصير عندهم أعراض الـ hemolysis

25
00:01:48,940 --> 00:01:52,580
طبعا أعراض الـ hemolysis hemoglobinuria during

26
00:01:52,580 --> 00:01:55,440
sleepعشانك أجى اسمها Nocturial

27
00:01:55,440 --> 00:02:02,780
HemoglobinuriaJoints and Hemocydrineuria هذه أعراض

28
00:02:02,780 --> 00:02:05,720
اللي هو الـ Hemolytic .. الـ Bionetch زي ما حكينا

29
00:02:05,720 --> 00:02:11,500
عبارة عن خلل مكتسب بيصير في الـ Hemobiotic Stem

30
00:02:11,500 --> 00:02:15,600
Cell بحيث أنه طبعا بيصير فيها mutation الـ

31
00:02:15,600 --> 00:02:19,900
mutation هذه بترتب عليها خلايا فيها بعض الـ

32
00:02:19,900 --> 00:02:25,020
abnormalitiesهذه الـ Abnormalities يعني بينتج عنها

33
00:02:25,020 --> 00:02:29,240
تكسير لخلايا الـ RBCs في الوضع الطبيعي بالـ

34
00:02:29,240 --> 00:02:31,980
Complement Components الموجودة بشكل طبيعي اللي

35
00:02:31,980 --> 00:02:36,700
المفروض مايصيرش تكسير للخلايا منها عند الإنسان الـ

36
00:02:36,700 --> 00:02:41,440
Normal طيب، طيب ليش بيصير الخلال هذا؟ الآن هدول

37
00:02:41,440 --> 00:02:45,940
الناس الـ mutation بنتج عنها تكوين خلايا فيها نقص

38
00:02:45,940 --> 00:02:49,440
في بعض الـ membrane-bound proteins زي الـ

39
00:02:49,440 --> 00:02:52,960
Acetylcholine esteraseالـ Neutrophil Alkaline

40
00:02:52,960 --> 00:02:57,940
Phosphatase الـ CD55 بـ K Accelerating Factor

41
00:02:57,940 --> 00:03:02,040
Homologous Restriction Factor CD59 Membrane

42
00:03:02,040 --> 00:03:08,960
Inhibitor of Reactive Lyses أو MIRL طيب نقص هذه

43
00:03:08,960 --> 00:03:12,600
البروتينات إيش بترتب عليه؟ خلّيني أشرح هلقيت الـ

44
00:03:12,600 --> 00:03:20,460
CD55 والـ CD59 والـ HRFهدول مهمين جداً في حماية

45
00:03:20,460 --> 00:03:24,900
الخلية من الـ complement-mediated attack يعني هدول

46
00:03:24,900 --> 00:03:28,560
بيحموا الخلية من الـ complement طبعاً أنتوا عارفين

47
00:03:28,560 --> 00:03:31,580
إن الـ complement إذا صار لها fixation على الخلاية

48
00:03:31,580 --> 00:03:36,580
هتعمل license للخلاية فهدول موجودين كحماية هدول

49
00:03:36,580 --> 00:03:39,240
عبارة عن cell markers موجودة على سطح الخلية

50
00:03:39,240 --> 00:03:45,930
موجودين كحماية لإلها الآن لو صار خلل فيهمأكيد

51
00:03:45,930 --> 00:03:49,170
الخلايا هتصير عرضة لـComplement Attack وحيصرلها

52
00:03:49,170 --> 00:03:56,810
Lysis الآن الـ CD59 إيش بيعمل Inhibits

53
00:03:56,810 --> 00:03:59,470
the formation of the terminal complex of

54
00:03:59,470 --> 00:04:04,240
complement componentكيف يعني؟ طبعا الـ complement

55
00:04:04,240 --> 00:04:08,300
عبارة عن cascade معين يعني خطوات متعددة في النهاية

56
00:04:08,300 --> 00:04:12,980
بتكون complex الـ complex هاد هو اللي بيعمل ال

57
00:04:12,980 --> 00:04:17,260
ISIS للخلايا فالـ CD59 بتمنع تكون هذا الـ

58
00:04:17,260 --> 00:04:20,440
complement and it has been established that the

59
00:04:20,440 --> 00:04:25,480
deficiency of CD59 is largely responsible for the

60
00:04:25,480 --> 00:04:30,120
complement sensitivity of BNH red cellsالآن غياب

61
00:04:30,120 --> 00:04:39,060
الـ CD59 مسؤول بشكل أساسي عن تكون خلايا الـ RBCs

62
00:04:39,060 --> 00:04:45,120
في حالة غيابه تكون خلايا
الها high sensitivity للـ

63
00:04:45,120 --> 00:04:49,460
complement يعني عدم وجوده بيخلي الخلايا حساسة جداً

64
00:04:49,460 --> 00:04:55,290
لـ complementBNH Type 3 هذا عادةً بنلاقي فيه

65
00:04:55,290 --> 00:04:59,910
Complete Deficiency في الـ CD59 بينما Type 2

66
00:04:59,910 --> 00:05:05,630
هنلاقي Partial Deficiency في الحالة طبعاً عشان هيك

67
00:05:05,630 --> 00:05:09,150
يعني هنلاقي فيه Difference في الـ Sensitivity بين

68
00:05:09,150 --> 00:05:14,650
الشخص والتاني حسب قداش كمية الـ CD59 الموجودة

69
00:05:14,650 --> 00:05:19,870
وهنلاقي اختلاف في حدة الأعراض وحدة الـ Hemolysis

70
00:05:24,300 --> 00:05:29,700
زي ما قلنا الـ BNH Red Cells عادة بتكون

71
00:05:29,700 --> 00:05:33,540
susceptible to lysis by complement يعني حساسة لإنه

72
00:05:33,540 --> 00:05:39,380
يصير لها تكثير عن طريق الـ complement هذه الشغلة

73
00:05:39,380 --> 00:05:44,120
بدنا ناخد خلايا RBCs ونشوفها هل هي فعلا حساسة إنه

74
00:05:44,120 --> 00:05:47,680
يصير لها lysis بالكمplement ولا لأ فهذه الفحوصات

75
00:05:47,680 --> 00:05:50,700
اللي ممكن نستخدمها في فحص اسمه Sugar Water Test

76
00:05:50,700 --> 00:05:54,530
هذا يعتبر كـ Screening Testالفحص التاني Sucrose

77
00:05:54,530 --> 00:05:58,690
Lysis Test والفحص التالت الـ Acidified Serum أو

78
00:05:58,690 --> 00:06:02,250
HAM Test اسمه يعني هذا الفحص الأول Screening

79
00:06:02,250 --> 00:06:07,090
والتانين التانين يعتبروا confirmatory tests لـ BNH

80
00:06:07,090 --> 00:06:10,710
يعني أنا بتاخد خلايا واشوف هال بيصيرلهم Lysis ولا

81
00:06:10,710 --> 00:06:13,850
ما بيصيرلهم Lysis في الظروف العادية

82
00:06:18,790 --> 00:06:22,670
يمكن في البداية لاحظته إحنا حكينا عنه Clonal

83
00:06:22,670 --> 00:06:27,270
Disorder بمعنى إنه مش كل الـ Stem Cells هتكون صارت

84
00:06:27,270 --> 00:06:31,430
فيها الـ mutation عشان هيك مش كل خلايا الـ RBCs

85
00:06:31,430 --> 00:06:35,470
هتكون فيها النقص في هذه الـ Factors اللي ع الـ

86
00:06:35,470 --> 00:06:39,610
Cell Membrane تمام؟ هنا بترتب عليه الكلام اللي

87
00:06:39,610 --> 00:06:43,690
بدنا نقوله الآنA characteristic feature of a

88
00:06:43,690 --> 00:06:48,260
positive test for BNHis that not all the patient

89
00:06:48,260 --> 00:06:52,000
cells undergoolysis يعني مش كل خلايا المريض راح

90
00:06:52,000 --> 00:06:56,220
يصير الهالايسيز حتى لو كانت الظروف optimal الظروف

91
00:06:56,220 --> 00:06:59,540
مناسبة وكل شي تمام لكن مش كل الخلايا هيصير

92
00:06:59,540 --> 00:07:04,020
الهالايسيز this is because only a proportion of

93
00:07:04,020 --> 00:07:07,160
any patient being a Schritzel population is

94
00:07:07,160 --> 00:07:11,220
hypersensitive to lysis by complementطبعًا لأنه زي

95
00:07:11,220 --> 00:07:14,460
ما قلتلكم مش كل الخلايا هيصير لها license

96
00:07:14,460 --> 00:07:18,120
بالـComplement وهتكون حساسة للـComplement وطبعًا

97
00:07:18,120 --> 00:07:23,660
هذه النسبة تختلف من شخص إلى شخص هنلاقي إنه في

98
00:07:23,660 --> 00:07:28,180
عندنا علاقة وطيظة ما بين عدد الخلايا اللي فيها

99
00:07:28,180 --> 00:07:31,960
مشكلة وما بين درجة الـHemolysis اللي بتصير يعني كل

100
00:07:31,960 --> 00:07:35,400
ما كانت عدد الخلايا اللي affected أكتر هيصير عندي

101
00:07:35,400 --> 00:07:40,440
Hemolysis أكترin vitro بغض النظر عن الفحص اللي أنا

102
00:07:40,440 --> 00:07:46,900
بستخدمه من الفخصات اللي ذكرناها إيش بيلزمني

103
00:07:46,900 --> 00:07:52,280
Reagent؟ هي الفكرة بكل بساطة أنه أنا بدي أجيب

104
00:07:52,280 --> 00:07:58,200
Saccharose solution isotonic أحط الخلايا فيه تمام؟

105
00:07:58,200 --> 00:08:01,380
وبعد ما أحط الخلايا فيه أضيفله complement

106
00:08:01,380 --> 00:08:07,510
component وأشوف هل صار licensed ولا ماصارشأذن

107
00:08:07,510 --> 00:08:11,850
بلزمني Sucrose Solution بلزمني Cyanomethamoglobin

108
00:08:11,850 --> 00:08:15,490
اللي هو الـ Drug Canary Agent بلزمني Test Tubes

109
00:08:15,490 --> 00:08:21,190
بلزمني A,B,O-Compatible Serum إيش يعني A,B,O

110
00:08:21,190 --> 00:08:24,470
-Compatible Serum؟ أول إش إلا إيش بلزمني السيرم؟

111
00:08:24,470 --> 00:08:28,370
بلزمني السيرم عشان أجيب منه complement يعني يعتبر

112
00:08:28,370 --> 00:08:33,170
كمصدر للـComplement تمام؟ طب ليش أنا بجيبه A,B,O

113
00:08:33,170 --> 00:08:37,830
-Compatible؟ لازم يكون من نفس الفصيلةعشان ما يصير

114
00:08:37,830 --> 00:08:41,950
الـ slices نتيجة تفاعل الـ Antibody الموجود في الـ

115
00:08:41,950 --> 00:08:46,350
Serum على مع الـ Antigen اللي على الخلايا فأنا بدي

116
00:08:46,350 --> 00:08:51,150
أجيب Serum متطابق أضيفه على الخلايا عشان حتى لا

117
00:08:51,150 --> 00:08:55,510
يتسبب فيه تكسير للخلايا وأنا أروح أفكر إن هذا

118
00:08:55,510 --> 00:09:01,120
التكسير جاي من الـ BNH تمام؟أو بنجيب سيرم من شخص

119
00:09:01,120 --> 00:09:06,140
فصيلته AB طب ليش اخترنا الشخص اللي فصيلته AB لأن

120
00:09:06,140 --> 00:09:10,760
الـ AB ما عنده antibodies في السيرم إذا توفر عندي

121
00:09:10,760 --> 00:09:14,680
شخص فصيلته AB باخد السيرم منه مافيش باخد

122
00:09:14,680 --> 00:09:20,120
compatible serum يعني من نفس الفصيلة تمام من شخص A

123
00:09:20,120 --> 00:09:24,020
normal بلزمني Sodium chloride بلزمني طبعاً Bybds

124
00:09:24,020 --> 00:09:28,830
Spetrophotometerوبلزمني تجهيزات أخرى طبعاً العينة

125
00:09:28,830 --> 00:09:34,550
بسحبها في Sodium Citrate طبعاً نسبة Sodium Citrate

126
00:09:34,550 --> 00:09:38,690
1 part إلى 9 parts of holy blood يعني باخد جزء من

127
00:09:38,690 --> 00:09:46,590
Sodium Citrate اللي تركيزه 0.109 مولر إلى 9 أجزاء

128
00:09:46,590 --> 00:09:53,470
من الـ holy blood طبعاً هذا الـ 0.109 مولر بعادل 3

129
00:09:53,470 --> 00:09:55,050
أو 8 من 10%

130
00:10:01,200 --> 00:10:05,900
الـ Principle للشغل بنجيب Washed Dread Cells يعني

131
00:10:05,900 --> 00:10:11,040
بجيب خلايا RBCs بعمللها Washing باستخدام Normal

132
00:10:11,040 --> 00:10:15,840
Saline عشان مايعمللهاش Hemolysis طبعاً في طريقة

133
00:10:15,840 --> 00:10:18,860
معينة للـ Washing أنه أنا بحط الـ Saline على

134
00:10:18,860 --> 00:10:24,160
الخلايا وبعد هيك بعمل Centrifuge بعد هيك بتخلص من

135
00:10:24,160 --> 00:10:28,120
الـ Saline هيك الـ Saline هياخد معاه الـ Plasma

136
00:10:28,120 --> 00:10:32,400
والبروتينات العالقة بالـ Plasma كليتهابكرر الخطوة

137
00:10:32,400 --> 00:10:36,540
هذه عشان أضمن أنه ماضلش عندي أي بلازمة أو أي

138
00:10:36,540 --> 00:10:40,620
بروتين موجود جاي من البلازمة بكرر عملية الـ

139
00:10:40,620 --> 00:10:44,860
Washing في النهاية الخلايا هتظل موجودة في وسط من

140
00:10:44,860 --> 00:10:47,920
الـ Saline بعد تكرار عملية الـ Washing هتكون

141
00:10:47,920 --> 00:10:52,220
الخلايا Suspended بـ Normal Saline تمام، إذا بجيب

142
00:10:52,220 --> 00:10:56,140
الـ Washed Red Blood Cells وبعمللها Incubation في

143
00:10:56,140 --> 00:11:02,360
Isotonic Saccharose Solutionفي محلول سكري Isotonic

144
00:11:02,360 --> 00:11:05,340
نفس تركيز الخلايا بحيث انه مايكونش سبب في الـ

145
00:11:05,340 --> 00:11:10,620
License لإلها وبضيف Normal ABA Compatible Serum

146
00:11:10,620 --> 00:11:16,080
بجيب Serum من شخص متوافق إذا أنا عملت الحاجات

147
00:11:16,080 --> 00:11:20,920
التلاتة الأساسية للفحص الشغلة الأولى وجود خلايا

148
00:11:20,920 --> 00:11:25,380
الشغلة التانية في Isotonic solution وأضافت عليهم

149
00:11:25,380 --> 00:11:29,920
Complement الآنفي هذه الظروف الـ Red blood cells

150
00:11:29,920 --> 00:11:33,820
هتاخد الـ component من السيرم و هتيجي الـ

151
00:11:33,820 --> 00:11:37,740
complement component من السيرم وتيجي على سطح الـ

152
00:11:37,740 --> 00:11:43,200
RBCs طيب الإنسان اللي عنده BNH هيكون susceptible

153
00:11:43,200 --> 00:11:49,140
أو sensitive للـ lysis فعشان هيك لو كان عنده BNH

154
00:11:49,140 --> 00:11:53,280
عند هذه الظروف هيصير lysis للخلايا بينما الشخص

155
00:11:53,280 --> 00:11:58,910
الطبيعيفي عنده حاجات هتحميه زي الـ CD55 والـ CD59

156
00:11:58,910 --> 00:12:02,510
هذه الأشياء هتحمي الخلايا عنده من الـ Lysis

157
00:12:02,510 --> 00:12:06,930
فبالتالي الـ Normal مش راح يصيرله Lysis في النهاية

158
00:12:06,930 --> 00:12:11,890
طبعاًAt the end of the incubation period the

159
00:12:11,890 --> 00:12:15,630
mixture is examined for hemolysis يعني بشوف هل حصل

160
00:12:15,630 --> 00:12:19,190
hemolysis ولا لأ وعملية ال examination من ال

161
00:12:19,190 --> 00:12:22,750
hemolysis بتتم عن طريق قراءة النتائج

162
00:12:22,750 --> 00:12:24,470
spectrophotometrically

163
00:12:27,650 --> 00:12:31,970
خطوات العمل طبعاً يعني احنا مش هناخدها بالتفصيل ان

164
00:12:31,970 --> 00:12:36,430
شاء الله في العمل اللي بناخدها أول حاجة بحضر

165
00:12:36,430 --> 00:12:41,550
washed cells بغسل الخلايا بطريقة إضافة blood على

166
00:12:41,550 --> 00:12:46,610
saline وبعمل centrifuge وبعد هيك بتخلص من ال

167
00:12:46,610 --> 00:12:51,850
saline بكرر عملية ال washing تلت مرات بعد هيك بعد

168
00:12:51,850 --> 00:12:56,730
ما أخلص من عملية ال washing هيظل عندي RBCs متجمعة

169
00:12:57,020 --> 00:13:02,060
لما اتخلصت من آخر مرة Saline حيظل عندي كمية من الـ

170
00:13:02,060 --> 00:13:07,000
RBCs متجمعة في الأمبوبا الـ Packed RBCs هلاقيت الـ

171
00:13:07,000 --> 00:13:12,440
Packed RBCs بدي أحضر منها Suspension 50%يعني خمسين

172
00:13:12,440 --> 00:13:17,640
RBCs وخمسين Ash Saline فباخد تلت نقاط من الـ RBCs

173
00:13:17,640 --> 00:13:21,920
الـ Suspended أو Equal Volume من الـ Backed RBCs

174
00:13:21,920 --> 00:13:25,820
على نفس الـ Volume من الـ Normal Saline إذا خلصنا

175
00:13:25,820 --> 00:13:32,260
خطوة تحضير الـ RBCs الخطوة اللي بعدها بدي أحضر لـ

176
00:13:32,260 --> 00:13:36,100
Blood Sacrosis Tube فشو بدي أعمل؟ بدي أجيب الـ

177
00:13:36,100 --> 00:13:40,080
Sacrosis Solutionوالـ Compatible Serum والخلايا

178
00:13:40,080 --> 00:13:45,740
وأعمل لهم Incubation مع بعض تمام هيك طبعا بحط

179
00:13:45,740 --> 00:13:51,060
Blank عشان أصفر الجهاز عليه وتكون قراقاتي بعد هيك

180
00:13:51,060 --> 00:13:55,980
صحيحة الآن

181
00:13:55,980 --> 00:13:59,560
بعد ما عملت الخطوة الأولى اللي هي كانت عبارة عن

182
00:13:59,560 --> 00:14:04,020
Incubation للخلايا مع الـ Complement مع الـ

183
00:14:04,020 --> 00:14:08,250
Saccharin solutionبدي أقرأ الـ Hemolysis و أقارن و

184
00:14:08,250 --> 00:14:12,190
أعمل نسبة مئوية للـ Hemolysis يعني أداش صار عندي

185
00:14:12,190 --> 00:14:16,530
Hemolysis لهذه العينة فعشان أقرأ الـ Hemolysis

186
00:14:16,530 --> 00:14:22,630
بحضر تلت قنافيب واحدة فيهم بسميها الـ Total واحدة

187
00:14:22,630 --> 00:14:26,710
للـ Blank واحدة لل Test الـ Total هذه ماكناش حاطين

188
00:14:26,710 --> 00:14:30,510
واحدة زيها قبل هيك الـ Total هذه زي ما قلتلكم أنا

189
00:14:30,510 --> 00:14:35,250
بدي أجيب الـ Absorbance الكل للـ Bloodعشان أشوف

190
00:14:35,250 --> 00:14:40,090
قداش نسبة الـ Hemolysis اللي حصلت فباجي على كل

191
00:14:40,090 --> 00:14:43,150
واحدة من هذه القنابيب بحط عليها Drupkin الـ

192
00:14:43,150 --> 00:14:45,250
Drupkin هذا اللي هو الـ reaction بتاع الـ

193
00:14:45,250 --> 00:14:47,850
Hemoglobin اللي بتفعل مع الـ Hemoglobin وبيعطيني

194
00:14:47,850 --> 00:14:52,730
لون عشان في النهاية أقرأ على 540 نانومتر بحط عليها

195
00:14:52,730 --> 00:14:57,090
كمية محددة زي ما هو L من الـ Drupkinأو باجي على

196
00:14:57,090 --> 00:15:00,550
أنبوبة الـ Total خلّوا بالكم بعد الـ Incubation

197
00:15:00,550 --> 00:15:04,710
هيكون يا بنات الخلايا ممكن يكون جزء من الخلايا

198
00:15:04,710 --> 00:15:10,280
صاروا Hemolysis فإيش بعمل؟ بعمل Mixingلأ، عينت الـ

199
00:15:10,280 --> 00:15:15,320
Blood لأن أنا الـ Total بدي أحسب كل الـ RBCs يعني

200
00:15:15,320 --> 00:15:18,760
بدي أحسب بالنسبة للـ Total Volume من الـ RBCs اللي

201
00:15:18,760 --> 00:15:22,320
أنا حطيته تمام؟ و بدي أحسب منه Unbooked الـ Total

202
00:15:22,320 --> 00:15:26,940
فباخد منه يعني بعد ما أعمله Mixingبعد الـ

203
00:15:26,940 --> 00:15:31,100
Incubation الأولى باخد منه كمية وبضيفها على الـ

204
00:15:31,100 --> 00:15:34,440
Drupkin هيك أنا بكون أخدت قراءة الـ Total

205
00:15:34,440 --> 00:15:39,420
Hemoglobin يعني كل الـ RBCs اللي أنا أضفتها أضفت

206
00:15:39,420 --> 00:15:44,500
عليها Drupkin وأخدت القراءة بتاعتها، تمام؟ بعد هيك

207
00:15:44,500 --> 00:15:48,160
باجي على أنبوبة Leblanc باخد Drupkin طبعا Leblanc

208
00:15:48,160 --> 00:15:50,840
زي ما انتوا عارفين بنمشي بنفس خطوات الفحص بس

209
00:15:50,840 --> 00:15:54,690
مانحطش Stableباخد من الـ Drupkin نفس الـ Volume

210
00:15:54,690 --> 00:15:59,610
بحط عليه 250 µL من أمبوبة البلانك الأولى اللى

211
00:15:59,610 --> 00:16:03,650
حطيناها بالخطوة الأولى فلقيت ال test ال test يا

212
00:16:03,650 --> 00:16:09,570
بنات يفترض انه اخد الجزء اللى صارله hemolysis من

213
00:16:09,570 --> 00:16:13,210
الخلايا طب كيف بدي اخد الجزء اللى صارله hemolysis

214
00:16:13,210 --> 00:16:17,330
من الخلايا فاكرين تجربة Cosmetic Fragility؟ كنا

215
00:16:17,330 --> 00:16:20,570
نعمل centrifuge وال supernatant تعبر عندي عن ال

216
00:16:20,570 --> 00:16:25,840
hemolysis، مظبوط؟فاروح بعمل centrifuge و باخد من

217
00:16:25,840 --> 00:16:30,860
السوبرناتان 250 ميكروليتر هلقيت لما باخد من

218
00:16:30,860 --> 00:16:36,240
السوبرناتان 250 ميكروليتر بكون أخد الـRBCs اللي

219
00:16:36,240 --> 00:16:43,040
صاريها Hemolysis منها 250 ميكروليتر وبعدها بقرأ

220
00:16:43,040 --> 00:16:48,330
النتائج يعني بعمل Incubationوبقرأ النتيجة اللي

221
00:16:48,330 --> 00:16:52,490
طلعت عندي على 540 نانومتر هيك بيكون عندي صفرت

222
00:16:52,490 --> 00:16:55,940
الجهاز على الـ Blankواخدت قراقة للـ Test واخدت

223
00:16:55,940 --> 00:16:58,800
قراقة لمين للـ Total الـ Test بس من الـ

224
00:16:58,800 --> 00:17:03,020
Supernatant الـ Total من كل العينة بعمللها Mixing

225
00:17:03,020 --> 00:17:07,220
و باخد منها الـ 250 µL طبعا بعد هيك زي ما قلتلكم

226
00:17:07,220 --> 00:17:10,080
بدي أقرأ الـ Absorbance أو الـ Optical Density

227
00:17:10,080 --> 00:17:13,300
والـ Percent Hemolysis بدي أحسب نسبة الـ Hemolysis

228
00:17:13,300 --> 00:17:16,800
اللي حصلت هتكون مساوة Optical Density أو

229
00:17:16,800 --> 00:17:20,060
Absorbance للـ Test على الـ Optical Density أو الـ

230
00:17:20,060 --> 00:17:22,540
Absorbance للـ Total في 100%

231
00:17:26,080 --> 00:17:31,540
هلقيت النتائج عندي الـ Negative أقل من 5% الـ

232
00:17:31,540 --> 00:17:36,380
Negative أقل من 5% الـ Positive أكتر من 10% طيب،

233
00:17:36,380 --> 00:17:40,840
من 6% لـ 10% إيش بعتبرها؟ بعتبرها Borderline يعني

234
00:17:40,840 --> 00:17:46,920
ربما صار License للخلايا لأسباب أخرى غير الـ BMH

235
00:17:46,920 --> 00:17:50,120
خليني أشوف إيش بعض الأسباب اللي ممكن تعمل

236
00:17:50,120 --> 00:17:51,220
Hemolysis للخلايا

237
00:17:57,380 --> 00:18:03,200
هذه الأسباب Increase Hemolysis من 6 لـ 10 أقل من

238
00:18:03,200 --> 00:18:07,860
10% ممكن يكون في حالات اللوكيميا أو الـ

239
00:18:07,860 --> 00:18:11,740
Myelofibrosis بينما الناس اللي عندهم PNH الـ

240
00:18:11,740 --> 00:18:17,200
Hemolysis يكون عندهم من 10 يتراوح من 10 إلى 80%

241
00:18:17,200 --> 00:18:23,590
تمام، نادرWill only rarely be as low as 5% يعني

242
00:18:23,590 --> 00:18:26,810
نادراً ما يكون الـ Hemolysis عندهم قليل إلا ما

243
00:18:26,810 --> 00:18:30,230
يكون عندهم مرتفع Results of Saccharose Hemolysis

244
00:18:30,230 --> 00:18:33,750
Test should correlate with Acid Serum Test يعني

245
00:18:33,750 --> 00:18:37,910
نتائج الـSaccharose Test هذا متطابق مفروض تكون

246
00:18:37,910 --> 00:18:41,110
كماماً مع الـAcid Serum Test أو اللي سمناها في

247
00:18:41,110 --> 00:18:46,530
البداية Ham Test يعطيكوا

248
00:18:46,530 --> 00:18:46,930
العافية