بسم الله الرحمن الرحيم موضوع اليوم إن شاء الله رب
العالمين راح يكون عن الـ Sickle Cell وكيف أنا أعمل
فحص Sickle Cell Test Sickle Cell Anemia عبارة عن
inherited disorder that leads to the production of
an abnormal hemoglobin variant Hemoglobin S يعني
عبارة عن مرض وراثي ينتج عنه تكوين نوع من
الهيموجلوبين الغير طبيعي اللي يسمى Hemoglobin S
Hemoglobin S production arises from an altered أو
mutated β-gene يعني بيصير فيه mutation في الـ Beta
chain بيؤدي إلى أنه بدل ما يتكون Hemoglobin A هيتكون
نوع آخر من الـ Hemoglobin الـ abnormal اللي هو
Hemoglobin SHemoglobin S differs from normal adult
hemoglobin only by a single amino acid
substitution يعني فرق فقط في Amino acid واحد
بيصير له استبدال اللي هنشوفه كمان شوية Hemoglobin
S زي ما قلت لكم بيصير خلل في الـ Beta Chain بحيث
أنه في الموقع 6 من الـ Beta Chain بدل ما يكون لـ
Glutamic Acid بيسير لـ Valine يعني بيروح لـ Glutamic Acid وبيحل محله
الـ Valine فبينتج عن هيك نوع جديد من الـ
Hemoglobin اللي هو Hemoglobin S طبعاً
هذا بينتج عنه وجود Hemoglobin S في داخل خلايا الـ
RBCs طيب إيش مشكلة Hemoglobin S؟ Hemoglobin S في
الوضع الطبيعي لما يكون كمية ال Oxygen الموجودة في
الـ blood طبيعية هيكون عادي وذائب في الخلايا ومش
عامل أي مشكلة لكن لو صار في نقص في ال Oxygen،
Hypoxia هتلاقي إن Hemoglobin S هيبلش يترسب بطريقة
معينة في داخل الخلايا مما يؤدي إلى تغيير شكل
الخلية زي ما أنتم شايفين في الزاوية تحت إلى C
shape ومنها جاء اسم الخلايا المنجلية الآن هذا الشكل
للخلايا بيخلي الخلية rigid يعني مش flexible مش
بسهولة ممكن تمر عبر الـ blood vessels الضيقة
فبالتالي لما ييجي blood vessel ضيق زي ما احنا
شايفين هنا هتيجي الخلايا هذه ما هي مارينة تمر
بسهولة وإنما هتعمل زي block للـ blood vessel هتسدده
يعني شايفين الخلية الطبيعية هنا؟ الخلية الطبيعية
بتمر بسهولة لكن الـ Sickle Cell هتبدأ تتجمع وتسكر
مجرى الوعاء الدموي مما يؤدي إلى آلام شديدة ومشاكل
في أعضاء معينة عند المريض المصاب بالـ Sickle Cell
Anemia الآن الشخص المصاب أو اللي عنده Hemoglobin S
قد يكون عنده فقط one gene يعني بيكون heterozygous
أخذ أحد الجينات من الأبوين والجين الآخر سليم وقد
يكون عنده الـ two genes S يعني homozygous S إيش
الفرق بين الاثنين اللي عنده one gene هنسميه Sickle
Cell Trait هيكون عنده من 20 إلى 40% فقط
Hemoglobin S وهذا الشخص ما بيعاني من مشاكل صحية
إلا في بعض الظروف الخاصة لازم أراعي يعني لو أعرف
مثلا أنه بده يطلع على أماكن مرتفعة ممكن أزود بـ
Oxygen إضافي زي في الطائرات أو أشياء من هذا القبيل
فهو لا يعاني من مشاكل صحية زي اللي هو مصاب بـ
Sickle Cell Anemia اللي بيكون عنده Homozygous هذا
بتكون عنده نسبة Hemoglobin S من 80 إلى 100%
Hemoglobin S طبعاً No Symptoms Under Normal
Conditions طبعاً زي ما أنتم شايفين حاطة الـ
Normal هنا بنقصان يعني الـ Normal بدو يكون نموذجي
مثالي جداً يعني الحالة اللي أنتم حاطينها هذا ما
بتحملها تعمل عنده Hypoxia أو ممكن تعمل عنده تكسير
أخذين بالكم؟ فالـ Normal إلنا بختلف عن الـ Normal
اللي عندهم الـ Normal بيكون نسبة الأكسجين ممتازة
طيب، هذا الشخص ممكن الظروف الـ Normal إلنا كمان
تكون Abnormal له زي مثلا، ظروف الـ Dehydration،
ظروف الجفاف لو صار عنده شوية Influenza لو صار عنده
أي Infection أو أي ظروف صعبة شوية احنا ممكن
نتحملها هذا الشخص ممكن تؤدي عنده إلى Hypoxia وتعمل
عنده Sickle Cell Crisis تمام؟ طبعاً هيصير عنده بعض
الأعراض اللي هي نتائج التكسير Joint Pain وصفار
وأعراض Hemolytic Anemia هنا بيذكرنا مع بعض بطريقة
وراثة Hemoglobin S حلقات إذا كانوا الأبوان حاملان
للـ Hemoglobin S هنلاقي إنه هيطلع عندهم 25% سليم،
50% Carrier، 25% مصابين الآن نشوف الـ RBCs اللي فيها
Hemoglobin S إيش بيصير فيها طبعا هذا الكلام احنا
شرحناه قبل بشوية بس هيك بدنا نجمله طبعا الـ RBCs
اللي فيها Hemoglobin S هذا النوع من الـ Hemoglobin
في ظروف نقص الأكسجين قلنا بتبلمر بتعمل
polymerization فبتخلي الخلية تتحول من الـ disk
shape إلى الـ crescent أو الـ sickle shape هذا الشكل
طبعا بيقلل من قدرتها على إنها تمشي بسهولة في الـ
blood vessels وبيقلل من قدرة الـ Hemoglobin أنه
يحمل الأكسجين بالإضافة لأن هذه الخلية شكلها
abnormal فبالتالي هتتكسر، هيصير لها تكسيروعمرها
راح ينقص، الافتراضي عمر الـ RBCs الافتراضي 120 يوم
هذه عمرها راح ينقص من 120 يوم إلى 10 أيام لـ 20
يوم فقط يعني الـ maximum اللي بتعيشه هذه الخلية 20
يوم طبعا هذا راح يؤدي إلى أن الشخص راح يصير
Anemic الخلايا هتتكسر على وتيرة عالية في حين أن
نخاع العظم مش قادر يعوض التكسير اللي بيصير بنفس
السرعة فبالتالي بيصير أنيميا عند الشخص المصاب
الشغلة الثانية زي ما قلت لكم أن الـ Sickle cells هذه
بتعمل Trapping و Blocking للـ blood vessels بتسكر
الـ blood vessels فممكن تعمل تلف في organs بتغذيها
الـ blood vessel يعني الـ vessel اللي بيغذي مثلا
organ معين أو عضلة معينة أو العظام مثلا هذا الـ
blood vessel ممكن يصير له تسديد فبالتالي يؤدي إلى
تلف الـ organ اللي هذا الـ blood vessel بيغذي
وبالتالي ممكن يؤدي إلى أعراض life threatening
Hydroxurea
as a treatment وجدوا أنه الناس اللي عندهم نسبة من
Hemoglobin F الـ sickling بيكون عندهم قليل الآن
Hemoglobin F طبعا احنا عارفين هو بيكون في المراحل
الأولى من حياة الطفل وفي الحياة الجنينية و
Hemoglobin F هذا بيختفي لغاية 6 شهور بيصير Normal
الآن الـ Fetal Hemoglobin is able to block the
sickling action of red blood cells يعني بتقلل من
تأثير الـ sickle cell أو من حدوث الـ sickling
للـ blood cells عشان هيك الأطفال اللي بيكون عندهم
Sickle Cell ما بتبين عندهم الأعراض غير لما
Hemoglobin F ينتهي أو ينزل ويصير زيّه زي الطبيعي
طيب، الـ Approach وجدوا إنه احنا لو رجعنا نعمل Switch
on لتصنيع الـ Hemoglobin F يعني نخلي الجسم يصنع
Hemoglobin F بكمية بسيطة بيقلل كثير من تأثير Sickle
Cell Anemia كيف؟ في علاج اسمه Hydroxyurea أو اسمه
تجاري Droxia هذا العلاج بيقلل الـ severity لأعراض
الـ Sickle Cell Disease عن طريق إنه بيعمل
stimulation لـ production of Fetal Hemoglobin طبعاً
يعني بيستخدم، بيستخدم عشان يمنع الـ acute sickle
cell crisis الآن نيجي للـ Sickle Cell Test أنا كيف
بدي أعمل Screening Test لوجود الـ Hemoglobin S هو
عبارة عن Blood Test بسيط يعتبر Screening Test يعني
بيخبرني إذا كان فيه Hemoglobin S أو ما فيه بس ما
بيعطيني النسبة الدقيقة لـ Hemoglobin S يعني ما
بيقول لي إذا كان المريض Sickle Cell Anemia ولا
Sickle Cell Trait في عندي ثلاث طرق الطريقة الأولى
Saline Citrate with Paraffin Oil الطريقة الثانية
Sodium Metabisulfite Method الطريقة الثالثة
Solubility Test الـ General Principle للثلاث إنه
أنا بدي أحط خلايا الـ RBCs في ظروف وأمنع عنها
الأكسجين وبعد هيك ألاحظ هل الخلايا هذه ظلت طبيعية
ولا عملت Sickling إذا عملت Sickling معنى الكلام إنه
فيها نسبة من Hemoglobin S إذا ظلت طبيعية معنى
الكلام إنها خالية من Hemoglobin S هذه الـ
Principle العامة للثلاث فحوصات
الطريقة الأولى Saline Citrate with Paraffin Oil
تعتمد هذه الطريقة أنه أنا بعمل Suspension للخلايا
في Saline Sodium Citrate وبتركهم مع Sealing للسطح
يعني بحط على وجه الأنبوب طبقة من ال Paraffin Oil
عشان أمنع دخول الأكسجين على الخلايا بعد Incubation
period مناسبة بأخذ عينة من الخلايا هذه وبأختبرها
تحت ال Microscope إذا كانت عاملة Sickling والطريقة
الثانية اللي هي الـ Sodium Metabisulfite method هذه
الطريقة بجيب Slide عادية بحط عليها Drop من الـ RBCs
مع Drop من Sodium Metabisulfite يعني Drop من الـ
Blood و Drop من Sodium Metabisulfite بعمل الـ Home
Mixing بعد هيك بحط عليهم Cover تمام بعد ما بحط الـ
Cover بجيب مادة عازلة بعمل Sealing لأطراف الـ Cover
فيها ممكن Petroleum Gel ممكن Vaseline ممكن أي مادة
عازلة بحيث أني أغطي أطراف الـ Cover وأمنع دخول
الأكسجين من الخارج لهذه الشريحة تمام؟ الآن إيش
الهدف من الـ Sodium Metabisulfite الـ Sodium
Metabisulfite عبارة عن Reducing Agent مادة نازعة للأكسجين
يعني أنا أول حاجة حطيت الخلايا في ظروف
منعت دخول الأكسجين عليها بالإضافة لإني أضفت لها
مادة نازعة للأكسجين كل هذا على Slide على الـ
Slide يعني كل هذا الشغل بعمله على الـ Slide بتركها
ساعة وبعد هيك برجع بأختبرها تحت الـ Microscope إذا
كان عاملة Sickling معنى الكلام إنه Hemoglobin-S
موجود إذا كانت الخلايا لازالت Normal معنى الكلام
إنه Hemoglobin-S مش موجود هذه الطريقة يعني سريعة
الطريقة الأولى تحتاج وقت لغاية ما تعمل Sickling لكن
هنا لأني أضفت مادة نازعة للأكسجين بتكون عملية
الـ Sickling أسرع الآن هذه إذا طلعت معايا Positive
فالـ Sickle Cell موجود لكن لو طلعت Negative بقول أنا
احتمال الوقت مش كافي فبتركها فترة .. فترة .. فترة
يعني لتاني يوم يعني ممكن أتركها طول النهار وتاني
يوم أرجع أشوفها مرة 24 ساعة عشان أتأكد
فعلاً إنه ما حصلش Sickling خلال الوقت هذا طبعاً
الطريقة
إن شاء الله هذه الطريقة احنا هنشتغلها زي ما قلت لكم
بأخذ One Drop من الـ Blood بضيف عليها One Drop من
الـ Metabisulfite Sodium Metabisulfite بعدها بحط
Cover طبعا بعد ما بحط الـ Cover إذا طلعت أي جزء من
الـ Sample نتيجة لما حطيت الـ Cover ممكن جزء من
الـ Sample يتسرب برا بمسحه بنظف كويس على أساس لما
بحط المادة العازلة تمسك بعد ما أجفف أي حاجة طالعة
من تحت الـ Cover بعد ذلك بحط مادة عازلة وبتركها زي
ما قلنا ساعة كاملة وبعدين بأختبرها على 40X ولو زي
ما قلت لكم شوفت أشكال اللي هو Sickle Cell أو Holly
Leaf Form حاجة زي شكل ورقة العنب أو زي شكل Sickle
Cell هذه الأشكال بتدل على إنه في Sickle Cell 178 00:1
وطويلة بس أطرافها دائرية مش مدببة زي الـ sickle
بديش ألخبط بينها وبين الـ sickle cell شغلة تانية
إذا رفعنا درجة الحرارة لـ 37 ممكن الـ sickling
يزيد وبينقص الـ sickling لو نزلت درجة الحرارة this
test should not be performed on infants less than
6 months في هذا الحال بالنسبة لأي نوع بدنا نختبره
من أنواع الـ hemoglobin مش لازم نفحصه قبل 6 شهور لأن
قبل 6 شهور بيبقى hemoglobin F له نسبة عالية طبعا
بهذا الطريقة احنا مابنقدر نفرق بين sickle cell
anemia و sickle cell trait بس احنا بنحدد اذا كان
في sickle hemoglobin S ولا لأ طبعا الفحص هذا يعني
لو كان positive يفضل ان اعمل فحوصات اخرى خاصة بالـ
hemoglobin زي فحص الـ hemoglobin electrophoresis
عشان اؤكد وجود sickle cell anemia ولا sickle cell
trait إذا كان الـ screening test negative معناه
الكلام إنه hemoglobin S مش موجود يعطيكوا
العافية