بسم الله الرحمن الرحيم موضوع اليوم إن شاء الله رب
العالمين راح يكون عن الـ Sickle Cell وكيف أنا أعمل
فحص Sickle Cell Test Sickle Cell Anemia عبارة عن
inherited disorder that leads to the production of
an abnormal hemoglobin variant Hemoglobin S يعني
عبارة عن مرض وراسي بنتج عنه تكوين نوع من
الهمoglobin الغير طبيعي اللي يسمى Hemoglobin S
Hemoglobin S production arises from an altered أو
mutated S-gene يعني بيصير فيه mutation في الـ Beta
chain بيؤدي انه بدل ما يتكون Hemoglobin A هيتكون
نوع آخر من الـ Hemoglobin الـ abnormal اللي هو
Hemoglobin SHemoglobin S differs from normal adult
hemoglobin only by a single amino acid
substitution يعني فرق فقط في amino acid واحد
بيصيرله استبدال اللي هنشوفه كمان شوية Hemoglobin
S زي ما قلتلكم بيصير خلل في الـ Beta Chain بحيث
أنه في الموقع 6 من الـ Beta Chainبدل ما يكون لـ
Glutamic Acid بيسير لـ Glutamic Acid Substitution
بالـ Valine يعني بيروح لـ Glutamic Acid وبيحل محله
الـ Valine فبترتب عن هيك نوع جديد من الـ
Hemoglobin اللي هو Hemoglobin S طبعاً
هذا بينتج عنه وجود Hemoglobin S في داخل خلايا الـ
RBCsطيب إيش مشكلة Hemoglobin S؟ Hemoglobin S في
الوضع الطبيعي لما يكون كمية ال Oxygen الموجودة في
ال blood طبيعية هيكون عادي و ذائب في الخلايا و مش
عامل أي مشكلة لكن لو صار في نقص في ال Oxygen،
Hypoxia هتلاقي إن Hemoglobin S هيبلش يترسب بطريقة
معينة في داخل الخلايا مما يؤدي إلى تغيير شكل
الخلية زي ما أنتوا شايفين في الزاوية تحت إلى C
shapeومنها أجى اسم الخلايا المنجلية الآن هذا الشكل
للخلايا بيخلي الخلية rigid يعني مش flexibleمش
بسهولة ممكن تمر عبر الـ blood vessels الضيقة
فبالتالي لما ييجي blood vessel ضيق زي ما إحنا
شايفين هنا هتيجي الخلايا هذه ما هياش مارينة تمر
بسهولة وإنما هتعمل زي block لل blood vessel هتسدده
يعني شايفين الخلية الطبيعية هنا؟ الخلية الطبيعية
بتمر بسهولة لكن الـ sickle cell هتبدأ تتجمعوتسكر
مجرى الوعاء الدموي مما يؤدي إلى آلام شديدة ومشاكل
في أعضاء معينة عند المريض المصاب بالـ Sickle Cell
Anemia الآن الشخص المصاب أو اللي عنده Hemoglobin S
قد يكون عنده فقط one gene يعني بيكون heterozygous
أخد أحد الجينات من الأبوين والجين الآخر سليم وقد
يكون عنده ال two genes S يعني homozygous Sإيش
الفرق بين اتنان اللي عنده one gene هنسميه Sickle
Cell Threat هيكون عنده من 20 إلى 40% فقط
Hemoglobin S وهذا الشخص ما بيعاني من مشاكل صحية
إلا في بعض الظروف الخاصة لازم أراعي يعني لو أعرف
مثلا أنه بده يطلع على أماكن مرتفعة ممكن أزود بـ
Oxygen إضافي زي في الطائرات أو أشياء من هذا القبيل
فهو لا يعاني من مشاكل صحيةزي اللي هو مصاب بـ
Sickle Cell Anemia اللي بيكون عنده Homozygous هذا
بتكون عنده نسبة Hemoglobin S من 80 إلى 100%
Hemoglobin S طبعاً No Symptoms Under Normal
Conditions طبعاً زي ما أنتوا شايفين حاطة الـ
Normal هنا بنقصان يعني الـ Normal بدو يكون نموذجي
مثالي جداً يعني الكمامة اللي أنتوا حاطينها هذا ما
بتحملها تعمل عنده Hypoxia أو ممكن تعمل عنده تكسير
اخدين بالكم؟ فالـ Normal إلنا بختلف عن الـ Normal
اللي عندهم الـ Normal بيكون نسبة الأكسجين ممتازة
طيب، هذا الشخص ممكن الظروف الـ Normal إلنا كمان
تكون Abnormal له زي مثلا، ظروف الـ Dehydration،
ظروف الجفافلو صار عنده شوية Influenza لو صار عنده
أي Infection أو أي ظروف صعبة شوية احنا ممكن
نتحملها هذا الشخص ممكن تقدي عنده إلهيبوكسيا وتعمل
عنده Cycling Crisis تمام؟ طبعاً هيصير عنده بعض
الأعراض اللي هي نتائج التكسير Joint Dis وصفار
وأعراض Hemolytic Anemia هنا بيذكرنا مع بعض بطريقة
توريس Hemoglobin Sحلقات إذا كانوا الأبوان حاملان
للـ Hemoglobin S حنلاقي إنه حيطلع عندهم 25% سليم،
50% career، 25% أسرار الآن نشوف الـ RBCs اللي فيها
Hemoglobin S إيش بيصير فيها طبعا هذا الكلام إحنا
شرحناه قبل بشوية بس هيك بدنا نجمله طبعا الـ RBCs
اللي فيها Hemoglobin Sهذا النوع من الـ Hemoglobin
في ظروف نقص الأكسجين قلنا بتبلمر بعمل
polymerization فبخلّي الخلية تتحول من ال disk
shape إلى ال crescent أو ال sickle shape هذا الشكل
طبعا بقلل من قدرتها على إنها تمشي بسهولة في ال
blood vessels و بقلل من قدرة ال Hemoglobin أنه
يحمل الأكسجين بالإضافة لأن هذه الخلية شكلها
abnormal فبالتالي هتتكسر، هيصير لها تكسيروعمرها
راح ي .. الافتراضي عمر الـ RBCs الافتراضي 120 يوم
هذه عمرها راح ينقص من 120 يوم إلى 10 أيام لـ 20
يوم فقط يعني الـ maximum اللي بتعيشه هذه الخلية 20
يومطبعاً هذا رح يقدّي على أش لأش أن الشخص رح يصير
Anemic الخلايا هتتكسر على وثيرة عالية في حين أن
البون ماروم مش قادر يعود التكسير اللي بيصير بنفس
السرعة فبالتالي بيصير أنيميا عند الشخص المصاب
الشغلة تانية زي ما قلتلكم أن الـ Sickle cells هذه
بتعمل Trapping و Blocking لل blood vessels بتسكر
ال blood vessels فممكن تعملتلف في organs بتغذيها
ال blood vessel يعني ال vessel اللي بيغذي مثلا
organ معين أو عضلة معينة أو العظام مثلا هذا ال
blood vessel ممكن يصير له تسديد فبالتالي يؤدي إلى
تلف ال organ اللي هذا ال blood vessel بيغدي
وبالتالي ممكن يؤدي إلى أعراض life threatening
Hydroxia
as a treatment وجدوا أنهالناس اللي عندهم نسبة من
Hemoglobin F الـsickling بيكون عندهم قليل الآن
Hemoglobin F طبعا احنا عارفين هو بيكون في المراحل
الأولى من حياة الطفل وفي الحياة الجنينية و
Hemoglobin F هذا بيختفي لغاية 6 شهور بيصير normal
الآن الـFetal Hemoglobin is able to block the
sickling action of red blood cells يعني بتقلل من
تأثير الـsickle cell أو من حدوث الـsickling
للـblood cellsعشان هيك الأطفال اللي بيكون عندهم
Sickle Cell ما بتبين عندهم الأعراض غير لما
Hemoglobin F ينتهي أو ينزل ويصير زيه زيه الطبيعي
طيب، الـ App وجدوا إنه إحنا لو رجعنا نعمل switch
on لتصنيع الـ Hemoglobin F يعني نخل الأدل تصنع
Hemoglobin F بكمية بسيطة بقلل كتير من تأثير Sickle
Cell Anemia كيف؟في علاج اسمه Hydroxyuria أو اسمه
تجاري Droxia هذا العلاج بيقلل الـ severity لأعراض
الـ Sickle Cell Disease عن طريق انه بيعمل
stimulation لـ production of Hemoglobin S طبعا
يعني بيستخدم، بيستخدم عشان يمنع الـ acute sickle
cell crisis الآن نيجي للـ Sickle Cell Test أنا كيف
بدي أعمل Screening Test لوجود الـ Hemoglobin Sهو
عبارة عن Blood Test بسيط يعتبر Screening Test يعني
بيخبرني إذا كان فيه Hemoglobin S أو ما فيه بس ما
بيعطيني النسبة الدقيقة لهemoglobin S يعني ما
بيقوللي إذا كان المريض Sickle Cell Anemia ولا
Sickle Cell Atrophy في عندي تلت طرق الطريقة الأولى
Saline Citrate with Paraffin Oil الطريقة التانية
Sodium Metabisulfite Method الطريقة الثالثة
Solubility Testالـ General Principle للتلاتة إنه
أنا بدي أحط خلايا الـ RBCs في ظروف وأمنع عنها
الأكسجين وبعد هيك ألاحظ هل الخلايا هذه ضالة طبيعية
ولا عملت Cycling إذا عملت Cycling معنى الكلام إنه
فيها نسبة من Hemoglobin S إذا ضالت طبيعية معنى
الكلام إنها بريقة من Hemoglobin S هذه الـ
Principle العامة للتلات فحصات
الطريقة الأولى saline citrate with paraffin oil
تعتمد هذه الطريقة أنه أنا بعمل suspension للخلايا
في saline sodium citrate وبتركهم مع sealing للسطح
يعني بحط على الوجه الأنبوب طبقة من ال paraffin oil
عشان أمنع دخول الأكسجين على الخلايابعد incubation
period مناسبة باخد عينة من الخلايا هذه و باختبرها
تحت ال microscope إذا كانت عاملة cycling و اللامية
اللي هي الـ Sodium Metabisulfite method هذه
الطريقة بجيب slide عادية بحط عليها drop من ال RBCs
مع drop من Sodium Metabisulfite يعني drop من ال
blood و drop من Sodium Metabisulfite بعمل ال home
mixing بعد هيك بحط عليهم coverتمام بعد ما بحط ال
cover بجيب مادة عازلة بعمل sealing لأطراف ال cover
فيها ممكن petroleum gel ممكن Vaseline ممكن أي مادة
عازلة بحيث أني أغطي أطراف ال cover وأمنع دخول
الأكسجين من الخارج لهذه الشريحة تمام؟ الآن إيش
الهدف من ال sodium metabisulfite ال sodium
metabisulfite عبارة عن reducing agentمادة نازي على
الأكسجين يعني أنا أول حاجة حطيت الخلايا في ظروف
منعت دخول الأكسجين عليها بالإضافة لإني أضفت لها
مادة نازي على الأكسجين كل هذا على slide على ال
slide يعني كل هذا الشغل بعمله على ال slide بتركها
ساعة وبعد هيك برجع باختبرها تحت ال microscope إذا
كان عاملة cycling معنى الكلام إنه Hemoglobin-S
موجود إذا كانت الخلايا لازالت normal معنى الكلام
إنه Hemoglobin-Sمش موجود هذه الطريقة يعني سريعة
الطريقة الأولى تحتاج وقت لغاية ما تعمل Cycling لكن
هنا لأني أضفت مادة نازي على الأكسجين بتكون عملية
الـ Cycling أسرع الآن هادي إذا طلعت معايا Positive
فال Cycle Cell موجود لكن لو طلعت Negative بقول أنا
احتمال الوقت مش كافي فبتركها فترة .. فترة .. فترة
يعني لتاني يوم يعني ممكن أتركها طول النهاروتانى
يوم ارجع اشوفها مرة اربع وعشرين ساعة عشان اتأكد
فعلا انه ماحصلش cycling خلال الوقت هذا طبعا
الطريقة
ان شاء الله هاد الطريقة احنا هنشتغلها زى ما قلتلكم
باخد one drop من ال blood بضيف عليها one drop من
ال Metabisulfite Sodium Metabisulfite بعدك بحط
coverطبعا بعد ما بحط الـ Cover إذا طلعت أي جزء من
الـ Sample نتيجة لما حطيت الـ Cover ممكن جزء من
الـ Sample يتسرب برا بمسحه بنظف كويس على أساس لما
بحط المادة العازلة تمسك بعد ما أجفف أي حاجة طالعة
من تحت الـ Cover بعد ذلك بحط مادة عازلةوبتركها زي
ما قلنا ساعة كاملة وبعدين باخبرها على 40X ولو زي
ما قلت لكم شوفت أشكال اللي هو Sickle Cell أو Holy
Leaf Worm حاجة زي شكل ورقة العنب أو زي شكل Sickle
Cell هذه الأشكال بتدل على إنه في Sickle Cell
Anemia أو Sickle Cell إترات طبعاً بترك العينة لو
طلعت معايا Negative لتاني يوم وبرجع بشوفها وبتأكد
إنه مافيش عنا Sickle Cell
هذه تكملت الطريقة طيب،
عند الفحص التالت اللي هو الـ Solubility Test هذا
الفحص بعتمد على أنه أنا بجيب الـ RBCs و بعمللها
License هلأ لما بعمل للـ RBCs License في ظروف نقص
الأكسوجين الـ Hemoglobin العادي هيبقى Soluble
بينما لو كان فيها Hemoglobin S أو Hemoglobin C
Hemoglobin S و C في ظروف نقص الأكسوجينهيعملوا
راسب، هيعملوا عكارة في المحلول هي فكرتها، إذا الـ
Erythrocyte are lysed by saponin and the released
hemoglobin is reduced by Sodium Hydrosulphite يعني
أول حاجة بعمل lyses بعد هيك بضيف Sodium
Hydrosulphite عساس يعمل نازع للأكسوجين in a
concentrated phosphate buffer تمام؟ تحت هذه الظروف
Reduced hemoglobin S is characterized by very low
solubilityand the formation of crystals يعني في
هذه الظروف، ظروف نقص الأكسوجين Hemoglobin S هيكون
مترثب ومكون ال crystals the presence of Hemoglobin
S or Hemoglobin C are indicated by the turbid
solution يعني وجود turbid solution قد يدل على
Hemoglobin S أو Hemoglobin C بينما Hemoglobin A
هيعطينا solution
طبعا إحنا بنختبر الـ turbidity من خلال إنه إحنا
بنجيب ورقة مسطرة عليها أسطور خطوط بهذا الشكل و
بحطها ورا للـ tube إذا كان الخطوط واضحة يعني
المحلول clear إذا كان الخطوط اختفت معنى الكلام إنه
المحلول مش clear وإن العينة positive فيها إما
hemoglobin S أو hemoglobin C بعض
النقاط اللي بناخد بالنا منها عند المناقشةفي
المناقشة اللي هي أول حاجة الـ Sickle Cell Shape أو
Leaf Shape Holy Leaf Shape اللي هو شكل ورقة العنف
زي ما قلتلكم لازم يبقى موجود بكمية كبيرة عشان
نعتبره positive وناخد بالنا الـ elongated cells
with round end مست not be confused with Sickle
Cell الخلايا اللي بتبقى elliptical بسميها رفيعة
وطويلة بس أطرافها دائرية مش مدببة زي الـ Sickle
بديش ألخبط بينها وبين الـ Sickle Cell شغلة تانية
إذا رفعنا درجة الحرارة لـ 37 ممكن الـ Sickling
يزيد وبينقص الـ Sickling لو نزلت درجة الحرارة this
test should not be performed on infants less than
6 months في هذا الحال بالنسبة لأي نوع بدنا نختبره
من أنواع الهمoglobin مش لازم نفحصه قبل 6 شهورلأن
قبل 6 شهور بيبقى Hemoglobin F له نسبة عالية طبعا
بهذا الطريقة احنا مابنقدر نفرق بين Sickle Cell
Anemia و Sickle Cell Threat بس احنا بنحدد اذا كان
في Sickle Hemoglobin S و لا لأ طبعا الفحث هذا يعني
لو كان positive يفضل ان اعمل فحوصات اخرى خاصة بال
Hemoglobin زي فحص ال Hemoglobin Electrophoresis
عشان اؤكد وجود Sickle Cell Anemia و لا Sickle Cell
Threatإذا كان الـ Screening Test Negative معناه
الكلام إنه Hemoglobin S مش موجود يعطيكوا
العافية